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2024-3-14

一、精選內毒素更低批次細胞對內毒素非常敏感，過高的內毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經常或長時間作用于細胞，一旦內毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養基”中生長，被內毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態”，進而影響實驗結果的穩定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養細胞時，應該選用內毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經是細胞典藏等重大項目...

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細胞支原體污染與細菌、病毒、真菌污染的區別支原體污染對細胞有很多危害。然而在支原體污染早期，細胞大多癥狀并不明顯，實驗人不易發現。污染到中后期，細胞才會有如下表現：由于支原體污染早期不易被發現，建議實驗室定期對細胞上清做適當監控（可使用德國MB公司的Verno®GemOneStep試劑盒或Verno®GemqOneStep試劑盒，取2ul細胞上清即可判別是否有支原體污染，靈敏度很高，覆蓋的支原體物種很廣）。那么，如何區分支原體污染與細菌、真菌、病毒的污染呢？它們的各自表現如下：細菌污染細菌在普通倒置顯... 查看詳情 2020-11-10
新guan病毒為什么要檢測多個靶點為什么新guan病毒不能只檢測一個靶點目前，市面上常見的新guan病毒檢測靶點為ORF1ab和N基因或E基因。但據WHO的相關文件，隨著疫情的進行，新guan病毒的靶點序列可能會產生突變，從而導致引物/探針無法與目的序列結合，導致假陰性。因此WHO建議檢測多個靶點。以往上建議篩查時先檢測E基因（包膜基因），在確證時檢測RdRp基因（即RNA依賴性RNA聚合酶基因），該基因有助于辨別新guan與其他冠狀病毒【1】【2】。參考文獻：1.CormanVM,BleickerT,Brü... 查看詳情 2020-11-10
【胎牛血清品質】的關鍵決定因素胎牛血清是細胞實驗室常用的培養基。血清品質與細胞狀態生長等密切相關。那么，什么與血清品質相關呢？這要從血清的生產談起。胎牛血清的生產一共分為四個過程：血源供應——質量核查——工藝處理——質量保證。這四個方面與血清的品質都有密切的關系。1.血源供應胎牛血清來自5-8個月胎齡的胎牛，系母牛剖宮后穿刺取血而來。如果是足月產，就不合乎要求了，一些促進細胞生長發育的因子在血清中也消失了。其次是這些母牛的健康狀況要好，沒有疾病，這要經過獸醫的檢查。母牛的身體和精神狀況會影響血液中的成分。... 查看詳情 2020-11-10
一些常見的限定化學成分培養基操作介紹限定化學成分培養基是指培養基中的素有成分都是明確的,它同樣不含有動物蛋白,化學限定培養基同樣也不是添加了植物水解物,而是使用了一些已知結構與功能的小分子化合物,如短肽、植物激素等.這種培養基更有利于分析細胞的分泌產物.目前已經有適合于293細胞、CHO細胞、雜交瘤細胞生長的CDM問世。一、常規培養和傳代1）在聚碳酸酯Erlenmeyer搖瓶中預平衡足量化學限定培養基1小時。2）確定活細胞密度。3）調整搖瓶工作體積（見英文說明書表2）。4）接種細胞密度為3×105細胞/ml5）... 查看詳情 2020-11-10
qPCR檢測支原體方法略述和PCR比起來，qPCR不用跑膠，實時監測擴增狀況，操作更為便捷。下面以德國MBVenor®GeM支原體檢測試劑盒（qPCR一步法）（Venor®GeMqOneStep）為例，略述檢測原理和過程。該試劑盒包括4管試劑，其中2管分別為緩沖液和PCR水，另2管為主要試劑。1管即mix，含引物、核苷酸、聚合酶、熒光素標記的探針和內部擴增對照。另1管為陽性對照，均為凍干粉。它通過擴增高度保守的rRNA操縱子，或者更準確地說，擴增支原體基因組中的16SrRNA編碼區，可... 查看詳情 2020-11-09
凍干粉試劑相對于液態試劑的優勢有些分子生物學試劑（例如Taq酶、mastermix、引物/探針）需要-20℃長期保存，它們是液體試劑。但我們常常可以發現，一些國外的分子生物學試劑是凍干粉形式，如下面兩例：例1，德國MB生產的ConviFlex™RT-TaqMix（RNA病毒檢測試劑盒，RT-qPCR）即是凍干粉形式，它里面含有MuLV逆轉錄酶、熱啟動Taq聚合酶及dNTP。它們都是4℃保存。在使用時，是先用復溶緩沖液把凍干粉溶解，再加入RNA模板和引物即可。例2，MB生產的SARS-CoV-2... 查看詳情 2020-11-09

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